Masson染色實驗原理

1.膠原纖維是人體中的結(jié)締組織的主要成分，分布在全身的各個部位，組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時呈白色，故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質(zhì)是具有韌性及緊固性，因此它能夠抵抗的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細(xì)不等的束，呈波浪狀。膠原纖維由許多根纖細(xì)的膠原纖維組成。在電鏡下膠原原纖維又由更細(xì)的原纖維構(gòu)成。根據(jù)Kramen和Little所進(jìn)行的電鏡研究證實，膠原纖維是*的，具有橫紋的（重復(fù)期為650）原纖維。當(dāng)存在病變時這些纖維可發(fā)生變形，常出現(xiàn)的就是膠原纖維的壞死，膠原纖維在稀酸里可發(fā)生膨脹，變成膠樣物。它們能被酸性染料染成深淺不一的粉紅色，這些往往跟淀粉樣物難以區(qū)別。由于它們的屈光率較弱，因而在光學(xué)顯微鏡下，很難與纖維區(qū)別。膠原纖維的分子長度約為3000，直徑約為14，分子量為300000。

2.膠原纖維的組成：

1) 細(xì)胞內(nèi)合成前膠原蛋白分子，成纖維細(xì)胞攝取合成蛋白質(zhì)所需的氨基酸，包括脯氨酸、賴氨酸和甘氨酸。在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的核糖體上按照特定的膠厚mRNA的堿基序列，合成前α-多肽鏈。后者邊合成邊進(jìn)入粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中，并在羥化酶的作用下，將肽鏈中的脯氨酸和賴氨酸羥化經(jīng)羥化后，三條前α-多肽鏈互相纏繞成繩索狀的前膠原蛋白分子。溶解狀態(tài)的前膠原蛋白分子，兩端未纏繞，呈球狀構(gòu)形，在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔風(fēng)或轉(zhuǎn)移到高爾基復(fù)合體內(nèi)加入糖基后，分泌到細(xì)胞外。

2) 厚膠原蛋白分子的細(xì)胞外聚合。細(xì)胞外的前膠原蛋白分子，在肽內(nèi)切酶的作用下，切去分子兩端球狀構(gòu)表部分，形成厚膠原蛋白分子，粗約1.5nm，長約300nm，厚膠原蛋白分子平行排列聚合成膠原纖維。聚合時，相互平的相鄰分子錯開1/4分子長度，同一排的分子，菌尾相對并保持距離，聚合成束，于是形成具有64nm周期橫紋的膠原原纖維。聚合時，分子內(nèi)，分子間的化學(xué)基因進(jìn)行縮合，交聯(lián)，增加厚纖維的穩(wěn)固性。若干膠原原纖維經(jīng)糖蛋白粘合成粗細(xì)子等的膠原纖維。中性自溶型膠原（neutrla-soluble collagen）→醛糖、縮醛類脂/肉豆蔻酸、類脂→不溶型膠原（insoluble collagen）

3.膠原纖維的顯示：

膠原纖維在HE染色法被染成粉紅色，除此之外，它還可以用一些陰離子的染料來進(jìn)行染色，如用淡綠可把它們?nèi)緸榫G色，用甲苯胺藍(lán)可將其染為藍(lán)色，在網(wǎng)狀纖維染色中，如不加以處理，它又可被染為棕黃色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在**細(xì)胞化學(xué)染色中，膠原纖維由于含的負(fù)電荷過多，常導(dǎo)致某些非特異性的染色，應(yīng)特別注意。