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簡要描述：磁珠分選細胞實驗步驟磁珠分選是一種常用的細胞分離技術(shù)，特別適用于免疫細胞的純化。
更新時間：2024-10-14瀏覽次數(shù)：444相關(guān)文章
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磁珠分選細胞實驗步驟
磁珠分選是一種常用的細胞分離技術(shù)，特別適用于免疫細胞的純化。
以下是基于最新信息的磁珠分選細胞實驗步驟：
1.樣本準備：
1.1使用抗凝劑處理外周血液樣本，并通過密度梯度離心法分離出PBMC（外周血單個核細胞）。
1.2如果處理組織樣本，需要將組織切碎并消化以制備單細胞懸浮液。
2.磁珠標記：
2.1計算細胞數(shù)量，并根據(jù)需要添加適量的磁珠。例如，對于每1億細胞，可能需要添加一定體積的磁珠。
2.2將磁珠與細胞懸液混合，輕輕混勻后在冰上孵育，以促進磁珠與目標細胞表面標志物的結(jié)合。
3.磁性分選：
3.1將磁珠標記的細胞懸液通過帶有磁性的分選柱。磁珠與細胞結(jié)合后會被吸附在分選柱中，而未標記的細胞則隨緩沖液流出。
3.2洗滌分選柱以去除未結(jié)合的磁珠和雜質(zhì)。
3.3使用適當(dāng)?shù)木彌_液將吸附在分選柱上的目標細胞洗脫，收集洗脫液中的細胞。
4.細胞收集與鑒定：
4.1收集洗脫的細胞，并進行必要的洗滌步驟以去除殘留的磁珠。
4.2使用流式細胞術(shù)或其他細胞鑒定方法檢查細胞的純度和活性。
5.實驗注意事項：
5.1在整個實驗過程中，應(yīng)保持細胞的低溫處理，以維持細胞活性。
5.2操作時應(yīng)輕柔，避免對細胞造成機械性損傷。
5.3確保使用的磁珠和抗體特異性高，以提高分選效率和純度。
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